شناسایی پروتئین های موجود در فیلترای کشت مایکوباکتریوم توبرکلوزیس سویه dt و مقایسه ی آن با پروتئین های توبرکولین انسانی توسط روش های الکتروفورتیک

چکیده زمینه و هدف : توبرکولین حاوی پروتئین های موجود در محیط کشت باکتری سل می باشد که توسط تری کلرواستیک اسید(tca) و یا آمونیوم سولفات رسوب داده شده اند و جهت تشخیص آلودگی به باکتری سل از آن استفاده می شود. هدف از انجام این مطالعه مقایسه ی توبرکولین انسانی تولیدی در موسسه سرم سازی رازی با پروتئین های موجود در فیلترای کشت مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می باشد. روش بررسی: ابتدا باکتری از محیط کشت جامد لونشتاین جانسون توسط محیط دوفازی به محیط مایع دورس هنلی منتقل شد و پس از رشد آن به مدت 6 هفته ، باکتری ها توسط فیلتر 22/0 میکرون از محیط کشت مایع حاوی پروتئین های ترشحی جدا شدند. سپس محلول حاوی پروتئین های ترشحی به صورت جداگانه توسط tca و سولفات آمونیوم ترسیب شدند. سپس توسط اسپکتروفوتومتر و پروتئین سنجی کجلدال، وجود پروتئین در نمونه های ترسیب شده تائید گردید. در انتها پروتئین های ترسیب شده توسطsds-page و رنگ آمیزی کوماسی بلو با توبرکولین انسانی استاندارد مقایسه شدند. یافته ها: نمونه ترسیب شده با tca دارای باندهای بیشتری در محدوده ی بالاتر از 20 کیلودالتون بود، در حالی که نمونه ترسیب شده با سولفات آمونیوم دارای باندهای بیشتری در محدوده ی پایین تر از 20 بود. همچنین پروتئین های توبرکولین انسانی نیز بصورت اسمیر و دارای وزن کمتر از 16 کیلودالتون بودند. نتیجه گیری: نتایج ما نشان داد که سولفات آمونیوم نسبت به tca، ترسیب کننده ای مناسب تر برای پروتئین های با وزن مولکولی پایین باشد. واژه های کلیدی: مایکوباکتریوم توبرکلوزیس،sds-page ، توبرکولین